薄层色谱具备的优点以及相应的条件选择

薄层色谱又叫薄层层析，是色谱法中的***种，常用TLC表示，是***种很重要的能快速分离和定性分析少量物质的实验技术，属固—液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，***方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另***方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的***种“预试”。

薄层色谱法就是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成***均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂***层吸附剂或支持剂，带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板***端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。

薄层色谱具有灵敏度及分辨率高、分离快速、操作方便、同时分离多个样品、样品预处理简单、设备简单等特点。由于这些特点，薄层色谱在实际工作中的应用十分广泛。薄层色谱仪即薄层扫描仪，是可以对斑点进行扫描的专用分光光度计，用可见光或紫外光作光源，线性扫描或锯齿扫描薄层板展开后的斑点，该斑点就吸收该组分特征波长的单色光，剩余的单色光经透射或反射或发射荧光，由检测器积分起来，获得这块斑点面积的待测物质含量。

另外，薄层色谱还有相应的条件选择：

（***）固定相选择

柱色谱中提到的吸附剂都可以用作为薄层色谱的固定相，分离性能及使用选择同柱色谱的选择原则相同。***般用于薄层色谱时，要求吸附剂的粒度更小。商品吸附剂区分为色谱***（用于柱色谱）和薄层色谱***（用于薄层色谱）。

（二）展开剂选择

薄层色谱展开剂的选择和柱色谱***样，主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大，对化合物的洗脱力也越大。选择展开剂时，除参照表列溶剂极性来选择外，更多地采用试验的方法，在***块薄层板上进行试验：

1.若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的极性过强；

2.若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点上，此溶剂的极性过弱。

当***种溶剂不能很好地展开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂。先用***种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物，若展开不好，用极性较大的溶剂与前***溶剂混合，调整极性，再次试验，直到选出合适的展开剂组合。合适的混合展开剂常需多次仔细选择才能确定。

（三）相对移动值

从点样原点开始到展开后的溶剂前沿，是溶剂的移动距离，记为lo，混合物中各组分的移动距离分别记为l1，l2，l3 …。在不同的展开条件下，各化合物的移动距离不会相同，而在同***条件下，相对于展开剂的移动距离，各化合物有可比较的展开数据，称为相对移动值，或比移值。在相同条件下测得的比移值可以用于化合物的薄层色谱特征值进行比较对照。

（四）显色

分离的化合物若有颜色，很容易识别出来各个样点。但多数情况下化合物没有颜色，要识别样点，必须使样点显色。通用的显色方法有碘蒸气显色和紫外线显色。

1.碘蒸气显色：将展开的薄层板挥发干展开剂后，放在盛有碘晶体的封闭容器中，升华产生的碘蒸气能与有机物分子形成有色的缔合物，完成显色。

2.紫外线显色：用掺有荧光剂的固定相材料（如硅胶F，氧化铝F等）制板，展开后在用紫外线照射展开的干燥薄层板，板上的有机物会吸收紫外线，在板上出现相应的色点，可以被观察到。