一起认识下实验室耗材配件大家族的重要成员——“色谱柱”
- 仪器网小编2020-10-20 13:30:00
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。而色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。
那么我们在使用色谱柱的过程中要注意什么呢?如果色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,***定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡***下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
在色谱柱的使用中,往往会出现***些问题,例如柱压的突然升高,(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),这种情况可能是由以下几点原因造成的:(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染; (2)色谱柱头的填料被样品污染; (3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出; (4)流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。那怎么解决呢?(1)如果确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声10分钟,重新装入色谱柱。(2)如果确定色谱柱头的填料被污染,将柱头螺丝卸下,挖出柱内前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔细修复后,重新安装上柱头螺丝。 (3)如果确定定是盐结晶,用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。(4)如果是因PH值使用不当,则很难恢复。
色谱柱对实验研究的成功可谓功不可没,所以我们也要善于保养色谱柱。如果色谱柱想要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。而且储存的温度***好是室温。
以上内容了解过后,相信你对色谱柱已经有了更加清晰的认知了。