RNAi文库是什么?
- 仪器网小编2020-12-17 16:08:30
RNAi (RNA interference,RNA干扰),是近年来发现的在生物体内普遍存在的***种古老的生物学现象,是由双链RNA(dsRNA)介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。
RNAi现象***早是在秀丽线虫中发现的。RNAi的机制可能是细胞内双链RNA在Dicer酶的作用下,可形成21nt~23nt的小干扰 RNA(small interfering RNAs,siRNAs),siRNAs可进***步掺入到多组分核酸酶(multicomponent nuclease,RISC)中并使其激活,从而精确降解与siRNAs序列相同的mRNA,完全抑制该基因在细胞内的翻译和表达。
独立的siRNA可用于研究单个基因的功能,可是后基因组时代的***,研究人员已经不满足于“***次缺失—— ***个基因”这样的研究节奏,功能基因组学的研究更需要***个能站在全局高度研究多个基因之间关系的工具,因此,shRNA/siRNA文库应运而生。 shRNA/siRNA文库联合使用高通量筛选技术和高内涵图像分析技术,使得RNAi筛选在反向基因组学、功能基因研究、药物发现等多个领域成为了***个 强大的应用工具。
RNAi是指***些小的与靶基因序列同源的双链RNA ( dsRNA)可以高效、特异性地阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,它也是体内抵御外在感染的***种重要保护机制。
较长ds RNA在ATP参与下被RNase皿样的特异核酸酶切割加工成21 ~23nt的由正义和反义链组成的小千扰RNA(smallinterfering RNA, siRNA)。siRNA 在ATP参与下被RNA解旋酶解旋成单链,并由其中反义链指导形成RNA诱导的沉默复合体[RISC) ,沉默同源靶基因。转基因真核生物中的dsRNA尚可引起相应基因的甲基化和染色质重构、凝集、异染色质化,***终导致基因沉默。