色谱柱使用注意事项
- 仪器网小编2020-12-14 16:02:25
色谱柱是***种内有固定相用于分离混合物的柱管,谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。在使用时要格外注意这样才不会影响柱销和缩减使用寿命。那么下面就和大***说说色谱柱的使用注意事项。
要避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的骤变或者色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况。
要逐渐改变溶剂的组成,尤其是反相色谱中。
***般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。可适当的在进样器前面连接***预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶。
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接***保护柱。
注:保护柱***般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
要经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除残留在柱内的杂质。
保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,将柱接头拧紧,以防溶剂挥发干燥。不能将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
色谱柱使用过程中,如果压力升高,烧结滤片被堵塞时应更换滤片或将其取出进行清洗;大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。
在分析柱前装***根与分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),保护、延长柱寿命。
色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。
每次工作完后,***好用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。
采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗。
含卤族元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触。
装在HPLC仪上柱子如不经常使用,应每隔4~5天开机冲洗15分钟。
以上内容则是色谱柱使用注意事项希望能够为大***带来帮助。