孔板成像好方法 — 真彩色白光透射

孔板成像是分子生物实验中必不可少的实验方案，其中孔板成像还可以用于病毒噬菌斑的计算和计数。

其主要的原理是将各稀释度的病毒液接种到单层细胞培养环境中，吸附***段时间后，在单层细胞上覆以琼脂糖，病毒感染细胞并在细胞中增殖，使细胞破裂死亡。由于固体介质的限制，释放的病毒只能由***初感染的细胞向四周扩展。经过几个增殖周期，便形成***个局限性病变细胞区，即病毒蚀斑。经中性红活细胞染料着色后，活细胞显红色，而蚀斑区细胞而不着色，形成不染色区域。病毒蚀斑如噬菌体感染细菌形成的噬菌斑。理论上，当病毒液充分稀释后，获得的每个蚀斑均源于***初感染细胞的***个病毒颗粒，即蚀斑中的病毒为***个病毒体的繁殖后代品系，由此达到纯化病毒的目的。除了可用于纯化病毒以外，空斑实验还可用于干扰素、抗体中和病毒繁殖能力的实验。

而目前该类实验主要采用显微镜成像的方式进行观察和记录。新***代的多功能生物分子成像设备Amersham ImageQuant 800能够利用白光透射模式，对孔板中的病毒噬菌斑进行真彩色成像光密度***定量和自动化数据分析。

显微镜的拍照虽然方便，但是储存数据和做定量分析非常麻烦。??

成像小助手可以帮助大***更好地得到和分析结果。采用新***代的多功能生物分子成像设备Amersham ImageQuant 800，它能够利用白光透射模式，对噬菌斑进行真彩色成像光密度***定量和数据分析。??

具体操作步骤：

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打开设备，选择OD measurement OD模式：选用OD白光透射托盘直接拍照即可得到结果。

 2 

机器会自动保存真彩色图片和TIF图，以及TIF图转换为OD值精确定量。

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打开IQTL高***多功能分析软件进行孔板等面积定量***分析即可。

(文章来源于仪器网)