你知道核酸提取仪的分类及原理吗?
- 仪器网小编2020-12-08 16:07:00
核酸是生命的***基本物质之***,可分为DNA和RNA两类,广泛存在于动物、植物细胞、微生物等所有生命体内。核酸提取包括DNA提取,RNA提取,质粒提取。核酸是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础,是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究,***先都需要对核酸进行提取和纯化。
核酸提取仪就是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用于疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、
法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等众多领域。
根据仪器型号大小不同,核酸提取仪可划分为自动液体工作站和小型自动核酸提取仪:
(1)自动液体工作站是功能非常强大的设备,提取核酸只是其功能的***个应用,但因为设备成本高昂,运行成本高,适合***次提取几千个同***种类标本,不太适合常规实验室提取核酸,所以真正得到应用的比较少。
(2)小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的,仪器设备和运行成本低,操作方便,可以在任何实验室使用,因而得到越来越多的应用。
根据提取原理不同,核酸提取仪可划分为采用离心柱法的核酸提取仪和采用磁珠法的核酸提取仪:
(1)离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,操作时间和手工提取差不多,但实际工作效率并没有提高,且样本需求量大,损失多,成本昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,仅适合经费充足的大型实验室使用。
(2)磁珠法以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。其操作简单快捷,大大提高实验效率,且成本低廉,因而可以在不同实验室使用,是目前市场上的主流仪器。
其中,磁珠法核酸提取仪又分为磁棒法和抽吸法两种类别:
(1)抽吸法就是通过自动移液装置来进行,通过自动移液装置来加入裂解液、磁珠吸附;再抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附;***后抽走漂洗液,加入洗脱缓冲液。但是抽吸法***大的问题在于,为了在去除废液的时候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠连同废液被抽掉,这样每***次抽废液的时候总有***小部分不能彻底的抽走,特别是磁铁在底部的装置,因为磁珠被磁铁吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近。
(2)磁棒法通量通常有8、16、32、96通道,相对于抽吸法,磁棒法的优点是每***步的液体不残留,因为磁棒只带走磁珠,转移到下***个步骤相应的反应孔中。如果选择磁棒法的提取仪器***好要功能更齐全的,比如可以加热,每个加热槽***好独立温控,这样可以设置加热、裂解、洗脱的不同温度。另外,带动磁棒的电机要能带动磁棒进行液体的快速混匀和搅拌,这样才有利于自动化和有助于裂解和漂洗彻底。
磁珠法是目前市场上的主流核酸提取仪器,磁珠法核酸提取是纳米科技与生物技术的完美结合,具有其它DNA提取方法不可比拟的优势:
1.样本需求量低:微量的材料即可提到高浓度的核酸;
2.操作简单快速:整个操作流程基本分为五步(裂解、结合、洗涤、干燥、洗脱),全程无需离心操作,大多可在30~60分钟内完成;
3.质量稳定可靠:游离的磁珠与核酸的结合量更大,特异性的结合使得核酸纯度更高,且可通过控制磁珠表面基团来调节核酸回收量;
4.全自动化操作:采用核酸提取仪可实现自动化、高通量操作,***键启动,即可实现几十甚至几百个样品的提取;
5.安全无毒无害:试剂不含酚、氯仿等有毒化学试剂,完全符合现代化环保理念。
总的来说,我们选择核酸提取仪时不***定越贵越好,也不***定非要某种牌子的,只要是产品属性契合自己试验要求和条件的,那就是合适的核酸提取仪。