量子产率是***个基本的光物理参数，它描述了***个样品的荧光效率，被定义为发射的光子数量与样品吸收的光子数量的比率。准确和可靠的量子产率测量对包括显示材料、太阳能电池、生物成像和药物开发等应用非常重要。
有两种测量量子产率的方法：绝对法和相对法。在绝对法中，量子产率是用积分球直接测量的，而在相对法中，未知样品的荧光强度与标准样品的荧光强度相比较，以计算出未知样品的量子产率。爱丁堡FS5荧光光谱仪（图1）通过相对法测量2-氨基吡啶（2AMP）的量子产率。2AMP在硫酸（H2SO4）中的量子产率以前曾被用作紫外-可见光范围内的参考标准。2AMP的量子产率在1968年测量为60%1，在1983年测量为66%2。这些文献中的量子产率参考值现在已经有几十年的历史了，这里我们用1M H2SO4中的硫酸奎宁（QBS）作为参考标准，用爱丁堡FS5荧光光谱仪对2AMP在1M H2SO4中的量子产率进行了重新测量和评估。
公式1
其中下标S和R分别表示待测样品（2AMP）和参比样品（QBS）。Φ是量子产率，I是综合荧光强度，A是激发波长下的吸光度。n是平均发射波长下用于待测样品和参比样品的溶剂的折射率。本文中，2AMP和QBS都使用了相同的溶剂（1M H2SO4），所以这项值为1。
为了提高计算出的量子产率值的准确性和精确性，***好的方法是准备和测量几个不同浓度的待测样品和参比样品。通过绘制2AMP和QBS的I与1-10-A的关系，可以用斜率（GradS和GradR）来计算量子产率（公式2）。这种方法可以防止潜在误差，如染料聚集，在较高的浓度导致的非线性。公式2
准备五种不同浓度的2AMP 1M H2SO4的溶液和五种QBS在1M H2SO4中的溶液。使用FS5荧光光谱仪测量吸收和荧光光谱，该荧光光谱仪配备有150W氙灯、PMT-980检测器和SC-05比色皿支架。
***先，通过使用FS5的内置透射检测器测量吸收光谱来确定五个浓度2AMP和QBS溶液的吸光度值。在激发波长（310 nm）下，溶液的吸光度值被保持在0.1以下，以尽量减少内滤效应的影响，吸光度值范围在0.008和0.098之间。2AMP和QBS的归***化吸收光谱显示在图2a中。图2：（a）2AMP（绿色）和QBS（紫色）的归***化吸光光谱。(b) 2AMP（绿色）和QBS（紫色）的归***化荧光光谱。(c) 不同浓度的2AMP的荧光光谱。C1溶液是浓度***低的（在310nm处的吸光度=0.01），C5是浓度***高的（在310nm处的吸光度=0.098）。所有光谱都是在爱丁堡FS5荧光光谱仪获得。
接下来，采集了5个2AMP和QBS溶液的荧光光谱。荧光光谱仪检测的荧光强度取决于激发波长、激发和发射带宽以及积分时间。通过保持这些参数相同，2AMP和QBS的综合荧光强度、IS和IR可以比较。实验参数是λex=310 nm，激发和发射带宽分别设置为3 nm和0.5 nm，步长为1 nm，积分时间为0.5 s。图2b显示了2AMP和QBS的归***化荧光光谱。每个浓度的2AMP的荧光光谱被合并到Fluoracle中***张图（图2c）。公式2中的斜率GradS可以使用Fluoracle的线性分析功能从图2c中的2AMP光谱中计算出来，如图3所示。为了计算GradS校准参数被设置为面积（橙色框），变量名称被设置为1-10-A（绿色框）。按 "应用 "计算面积（综合荧光强度）。然后输入从吸收光谱中得到的每种浓度的2AMP的吸光度项（1-10-A）值（浅蓝色框）。图3：Fluoracle中图2c的线性分析
校准类型为线性，并勾选了通过零点的曲线（深蓝色框）。荧光强度与吸光度的积分项与线性拟合***起绘制在屏幕的右下方。曲线的斜率（GradS）为K1（红色框）。然后对五个QBS光谱重复同样的过程来计算斜率GradR。两条曲线及其计算的斜率都显示在图4中。图4：综合荧光强度与2AMP和QBS的吸光度的关系
QBS在H2SO4中的量子产率的文献值为ΦR=56.1%4。然后用公式2计算出2AMP在H2SO4中的量子产率为64.3%，这个值与以前报道的60%和66%的值***致。结 论
爱丁堡FS5荧光光谱仪用相对法测定2AMP在1M H2SO4中的量子产率。通过FS5 Fluoracle软件的线性分析功能，数据分析变得简单。使用QBS作为参考标准，计算出2AMP的量子产率为64.3%。这个数值与以前的文献报告相***致，表明FS5可以进行准确和可靠的相对量子产率测量。
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