不同PCR仪的区别及运用

简单的说，PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制的目的。

***个基本的PCR须具备：

①要被复制的DNA模板 Template

②界定复制范围两端的引物Primers

③DNA聚合酶Taq. Polymearse

④合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水

目前常用的技术，可以将***段基因复制为原来的***百亿至***千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR仪，实时荧光定量PCR仪四类。

把***次PCR扩增只能运行***个特定退火温度的PCR仪，叫传统的PCR仪，也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的，对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究，教学，医学临床，检验检疫等机构。

***次性PCR扩增可以设置***系列不同的退火温度条件（温度梯度），通常有12种温度梯度，这样的仪器叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段，其***适退火温度是不同的，通过设置***系列的梯度退火温度进行扩增，从而***次性PCR扩增，就可以筛选出表达量高的***适退火温度，进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。

原位PCR仪用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪，如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性，使PCR反应体系渗透到组织和细胞中，在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增，不但可以检测到靶DNA，又能标出靶序列在细胞内的位置，于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。

在普通PCR仪的基础上增加***个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，就成了荧光定量PCR仪。荧光定量PCR仪有单通道，双通道，和多通道。当只用***种荧光探针标记的时候，选用单通道，有多荧光标记的时候用多通道。该仪器主要用于医学临床检测，生物医药研发，食品行业，科研院校等机构。