液相色谱柱的应用及保存
- 2023-09-19 10:32:28
液相色谱是***种广泛应用于生物、化学、环境等领域的分离技术,其原理是利用柱填料对混合物进行分离,通过不同成分在柱填料中的分配系数(K值)的差异实现分离。作为液相色谱系统的核心组件,液相色谱柱可直接影响到样品分离效果和分离速率,是液相色谱分离的关键组成部分之***。
色谱柱在使用前,*好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是**条件),只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。
液相色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,***定要注意液相色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡***下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
色谱柱的保存
(1)反相液相色谱柱色谱柱每天实验后的保养:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)长期保存色谱柱:
如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂****或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度*好是室温。
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