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几种常见的PCR仪的区别及保养

仪器网小编2020-11-17 15:52:02

PCR仪作为分子生物学相关实验的常规仪器,每年都有数千台的选购量,但是如何选择PCR仪,相信大***在选择时还有***些困惑。PCR仪作为***种精密仪器,平时应该怎么保养?下面给大***讲解***下

常见几种PCR仪分类
普通PCR仪
***般把***次PCR扩增只能运行***个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。
主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。


梯度PCR仪
***次性PCR扩增可以设置***系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNApian段其***适合的退火温度不同,通过设置***系列的梯度退火温度进行扩增,从而***次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的***适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。正真的梯度,是每***排管都有精确的加热控温探头,其他的都是从两头的热传递来设计控温。
梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。

梯度PCR仪

荧光定量PCR仪
在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用***种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为***次只能检测***种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现***次检测多种目的基因的功能。
实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。

荧光定量pcr仪

在PCR仪的维护保养中,需要注意以下问题:

1.PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定***般半年至少***次。
2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不***致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1——2℃时,可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。
3.PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的降温过程超过60s,就应该检查仪器的制冷系统,对风冷制冷的PCR仪要较彻底地清理反应底座的灰尘;对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。
4.***般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,必要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。


(来源: 仪器网小编)