选购高速逆流色谱仪要注意哪些关键性指标?
- 仪器网小编2021-03-29 16:04:43
高速逆流色谱简称HSCCC,是***种液-液色谱分离技术,它的固定相和流动相都是液体,没有不可逆吸附,具有样品无损失、无污染、高效、快速和大制备量分离等优点,已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域,特别在天然产物行业中已被认为是***种有效的新型分离技术,适合于中小分子类物质的分离纯化。
高速逆流色谱仪利用液液两相的逆流分配,在没有固体填料、不需使用固态固定相的情况下,而是利用离心力产生的恒定力将固定相保留在由管道连接的***系列的腔体中,实现复杂化学物质的混合物分离。它以液体溶剂为固定相,螺旋柱在行星运动时产生的离心力,使互不相溶的两相不断互相混合,同时保留其中的***相,使用恒流泵连续输入另***相,样品溶质在两相之间反复分配,按分配系数的次序,被依次洗脱出来,它替代了传统制备型高效液相色谱的填充柱。
那在选购***台高速逆流色谱仪的时候,哪些指标是衡量其性能的关键指标呢?
(***)固定相保留率
由于高速逆流色谱仪的固定相是液体,在分离过程中如何将液体固定相***直保留在里面,是所有生产厂***和使用者***关心的问题,它是由仪器的本身性能决定的,它与公转半径、自转半径、旋转速度等因素有关,也与流动相的流速有关联,与溶剂体系关系不大;***好设备的固定相保留率可以达到90%;***般设备的固定相保留率为50%。
如果设备的固定相保留率较低,则对两相溶剂体系的选择和配比要求就高,使用者就需要不断调整溶剂配比,进行多次实验摸索,找到***佳的配方,以提高样品的分离度,才能将样品中的多个成分分离出来;如果设备的固定相保留率很高,对两相溶剂体系的选择和配比要求就十分宽松,稍微调整就能将样品中的多个成分分离出来,更为重要的是有些样品只有在高的固定相保留率下才能分开,固定相保留率低就无能为力了。
(二)线圈的数量和柱体积
近几年动态平衡技术大幅提高,***先实现了每个线圈可以独立绕制就能平衡,其次完成了多个线圈混合绕制,***终实现了***台仪器上可以放置多个线圈的梦想,经常配置两个线圈或四个线圈。
柱体积是由线圈的直径和长度决定的,其大小影响到上样量的多少,合理的配置柱体积可以覆盖大部分样品的制备。如果条件允许,配置4个不同柱体积的线圈,使用起来将更方便,能实现线圈之间的串并联,从而提高样品的分离效果和分离能力。
(三)线圈的材质
高速逆流色谱仪的线圈材质***般使用PTFE材料,它耐酸耐碱,同时适合所有的有机溶剂,材质价格也便宜,重量较轻,很容易实现动态平衡,但唯***缺点是耐压较低,在高速旋转的情况下,工作压力超过10bar或者线圈出口堵塞,PTFE线圈就有可能爆裂,产生溶剂泄漏;***旦发生内部线圈爆裂,对设备将是毁灭性的,修复的成本是十分昂贵的;采用316不锈钢制作线圈,是近几年动态平衡技术大幅提高以后才出现的,彻底解决了高速逆流色谱仪耐压低的缺陷,工作压力可以承受1000bar,由于316不锈钢材质较重,成本高,线圈绕制难度大,动态平衡技术要求高,从而导致仪器整体价格偏高;钛合金是近几年出现的***种新型材料,它克服了316不锈钢材质较重的缺点,对动态平衡技术要求不高,但钛合金材质的价格比316不锈钢要贵出很多,是三种材质中的仪器价格***贵的。
除此之外,设备的各个安全保护功能,进样六通阀,以及不同体积的样品定量环是高速逆流色谱仪必须配置的,以便于今后的安全保障和使用方便。
高速逆流色谱在天然产物有效成分的分离纯化领域中有着独特的优势,还可以实现多种形式的梯度洗脱过程,既可用于天然植物粗提物的去除杂质,也可用于***后产物的精制,甚至直接从未经处理的粗提物***步纯化得到纯品。随着越来越多的研究者的加入,高速逆流色谱将得到更加广泛的应用和发展。