WAVEò核苷酸片段分析系统是***种全新的分子生物学检测的技术平台,其原理是在液相色谱仪的基础上通过***个特殊的DNA分离柱(系列专利见附件1)及相应的配套数据工作站,实现对DNA片段大小的分离,DNA碱基突变的检测,寡核苷酸(OLIGO),RNA,反义-OLIGO和siRNA的分析和纯化。
WAVEò核苷酸片段分析系统的关键技术在于:
1. DNA分离柱(Transgenomic专利,U.S. Patent No.5,972,222; 5,772,889;5,997,742;5,986,085)
1) 无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相基质;
2) pH值工作范围: 2-14;
3) 温度工作范围: 20-95℃;
4) 可以在DNA非变性(50-52℃),部分变性(53-78℃)和完全变性(80℃)条件分析和分离核苷酸片段;
5) DNA Sepò分离柱寿命大于6000次进样;
6) 可完成从分析(0.1nmol)到制备(5mmol)大样品浓度变化;
7) 重复精度: £ 1%
8) 色谱柱可再生使用.
2. WAVEMakerò WAVEò核苷酸片段分析系统专用软件包功能(安装在主机计算机内):
1) 可预测DNA片段变性温度(Tm值);
2) 可预测DNA片段给定温度下,每***不同位置碱基变性的百分比;
可根据不同DNA片段,控制WAVEò核苷酸片段分析系统中缓冲液的梯度条件;
3) 可预测给定DNA片段流出分离柱的保留时间;
4) 可实时数据采集;
5) 结果数据处理(RT-PCR);
6) 帮助设计DNA片段PCR引物;
WAVEò核苷酸片段分析系统主要用于:
* DNA片段已知和未知突变和多态性的筛查;
* 植物基因自动分析;
* 肿瘤流行病学的研究;
* 分子遗传病学的研究;
* 法医学和亲子关系研究;
* 种群研究;
* 其他与基因相关联疾病诊断的研究;
* 分子生物学技术质量控制;
WAVEò核苷酸片段分析系统性能指标:
a) 双链DNA片段大小分析: 分辨率优于1/100; 片段大小范围: 50-2000bp(DNA Sepò分离柱温度范围:50-52℃);
b) 突变检测: DNA片段大小范围:80-1000bp可检测单碱基突变;
c) 对未知的SNP和单个核苷酸突变, 系统检测的准确率大于96%;
d) 对已知的SNP和单个核苷酸突变, 系统检测的准确率大于99.9%;
e) 突变检测DNA Sepò分离柱温度范围:53-78℃;
f) 高通量突变检测: 8分钟/样;
g) 寡核苷酸(oligo)质量控制, DNA Sepò分离柱温度范围: 80℃
h) 寡核苷酸(oligo)质量控制: 5-80mer, 可检测单碱基差别; 5-30mer, 可检测相同长度寡核苷酸中单碱基序列的差别;
i) RNA分析, DNA Sepò分离柱温度范围: 80℃
j) RNA分析, 检测范围: 200-5000nts, 分辨率优于1/100;
k) WAVEò核苷酸片段分析系统具备纯化DNA,Oligo, RNA的能力;
l) WAVEò核苷酸片段分析系统结果重复率可达99.9%以上