SPRimagerII®分子相互作用芯片分析系统
SPRimager® II芯片分析系统是美***GWC公司专门为分析分子间相互作用而设计的仪器。该仪器利用等离子共振原理,采用矩阵排列的芯片对样品进行分析,由于矩阵芯片在1-CM流动池中是暴露在相同的样品中,完全消除了多通道分析系统中通道与通道之间的差异,而且可以同时采集矩阵芯片上所有探针的数据。
无需标记物
SPRimager II采用表面等离子共振成像(Surface Plasmon Resonance imaging, SPRi)的原理来检测与芯片上的探针结合的分子,无需使用诸如荧光标签之类的标记物。由于标记分子涉及了对其结构进行化学修饰,因此有可能会影响分子的功能,这对蛋白质组学的研究来说是***个很大的问题。因此,采用无需标记的系统,如SPRimager® II 是对蛋白质相互作用的功能分析优先选择的途径。
SPRimagerII可以使您在采集数据的同时观察芯片阵列的图像,并同时绘出相互作用的过程。这样就大大加快了方法的建立过程,使您能够将注意力集中在检测过程中实验的进展上来。由于该系统无需标记,因此,也就无需再为荧光标记的淬灭而担忧。
用途广泛
如果您有多种研究兴趣,或者您的实验方案需要改变,您会发现SPRimager® II的使用范围宽广,这对您是十分方便的。SPRimager II检测分子间的作用,不涉及样品的化学组成,因此该仪器用途十分广泛:从抗体到抗生素、从细胞到细胞因子、从配基到凝集素、从寡核苷酸到寡聚糖、从毒素到转录因子、从蛋白质到多肽、以及从核酸适体到酶原,SPRimager® II即可以用于您目前的研究,又可以满足您未来的需求。以下是SPRimager® II的部分应用领域:
蛋白质-蛋白质相互作用
抗体-蛋白质相互作用
抗体-抗原之间的亲和力
DNA-DNA或DNA-蛋白质的结合过程
转录因子与dsDNA序列的结合
抗体的表征
抗原决定基的定位
分子作用的可逆性…
此外,不要忘记对于蛋白质组学而言,不仅仅局限于成对的相互作用。您可以通过SPRimager® II监测多种循序的结合事件,分析配基依赖性结合和竞争性结合活性。已发表的文献提供了***些使用这个系统完成的多种多样的成功的范例。
灵活易用
用户友好的SPRimager® II系统将您放在驾驶员的位置上,使得您可以选择对研究***有利的实验设计。您可以选择GWC提供的任何***种应用方法,或不断增长的文献中发表的方法,也可以建立自己的方法。您可以随时通过我们的技术代表得到全方位的支持。
要得到SPR图像,您可使用SPRchip™或SpotReady™芯片基板,通过自动点样机或手工点样方式制作芯片。用您实验是现有的移液器就可以对SpotReadyTM芯片基板进行点样了。GWC提供的所有芯片基板都是无右旋糖苷的,因此,您无需担忧多聚物对目标分子与芯片探针造成的非特异性干扰。
配套齐全
所有的SPRimager®II系统都包括了泵、流动池、软件,配备电脑后即可使用。将这个系统安装起来并顺利地运行起来可能比您想象的还要简单,您无需投入更多的资源来学习如何使用这套系统,只需要在仪器安装过程中接受简单的培训就可以开始您的实验了。
SPRimager®II 系统主要特点
图像采集容量 ― 同时采集观察区内的所有图像。高灵敏度的近红外CCD摄像机配合高通量的采集镜头获得高清晰度的图像数据。
实时数据采集 ― 可以对图像和曲线数据进行实时显示并存储备用。
分析物传送泵 ― 已包括在系统的基本配置中。可按连续流或静息流模式采集数据。
偏振控制 ― 采集s-偏振光的响应。可以直接将其转换为绝对反射率值来比较不同实验的结果,而无需设定随意的相对测量单位。
入射光角度在40º – 70º可以调节 ― 可以灵活地对不同类型的表面进行测定,可以采集液体及空气中的SPR检测数据。
操作波长为800 nm ― 为您提供了在1-CM直径的流动池中测量灵敏度和分辨率***佳的平衡。也可以根据要求,GWC公司为用户设定特定的波长。
SPRimager® II系统在分子相互作用芯片阵列分析中的优势
适用范围广
SPRimager® II系统能分析几乎的所有生物分子的相互作用。已发表的案例包括分析抗体、抗原、抗菌素、核酸适体、配体、凝集素、寡核苷酸、蛋白质、多肽、寡聚糖、毒素、转录因子等等。与多通道SPR分析系统不同的是SPRimager® II系统独特的液体系统设计,使得人们可以监测整个细胞及病毒体。例如,用蛋白质配体阵列表征细胞受体特征。请参阅D Peelen, V Kodoyianni, J Lee, T Zhang, MR Shortreed, LM Smith2006年发表的论文:Specific capture of mammalian cells by cell surface receptor binding to ligand immobilized on gold thin films。J. Proteome Res. 5:1580-1585。
探针数量及点板格式有很大的空间供用户选择
多通道SPR系统多是在2至4通道中放置探针,因此,每次***多只能分析2至4个探针。即便是花费USD 750,000或更多的昂贵系统***次分析的探针***多也不超过20个。与其不同,SPRimager® II 系统采用的是开放式的工作平台,使用者完全可以自行控制探针的数量及点板格式:
选择用于快速手工点样预制的SpotReadyTM芯片基板。
选择SpotReadyTM芯片允许使用移液器手工点样。
纯金斑点(每个SpotReadyTM芯片有16或25个点)周围涂有疏水层 — 使溶于水的探针形成1 – 2 微升的不连续小珠。
SpotReadyTM基板特别适用于快速的方法开发以及低密度的阵列。
SpotReadyTM芯片基板主要用于自动点样操作及高密度阵列。
SpotReadyTM芯片基板具有均***的纯金表面,可以用于各种阵列格式。
适用于针尖式点样系统及压电式点样系统。
GWC提供的这种芯片基质的适用性使你可以对从几个到几百个探针的阵列进行分析,并允许你而不是仪器来控制实验设计。而且,无论是选用SpotReadyTM或SpotReadyTM芯片基板构建阵列,你都不会受到仪器的限制。
得到更完整的信息
市面上多通道分析系统提供的实时数据对于常规使用是可以的。但是如果你想知道探针与分析物的作用过程发生了什么,你就需要得到原始数据。而目前市面上的SPR产品均不能提供这些信息。GWC的SPRimager® II平台可以为你提供每次分析的原始数据。此外,由于SPRimager® II系统采集矩阵的实时图像,因此可以向你提供发生在芯片矩阵上的实时变化。而这些变化是十分珍贵的肉眼可见的显示。这***功能对于方法的建立和严格的实验解释都是不可缺少。
SPRimager® II系统通过仪器的高精度的视频采集电路向控制电脑传送CCD图像。图像数据通过V++分析软件进行定量分析及图像显示。定量数据通过Excel进行实时绘图并提供完整的原始数据。系统允许你自由地进行各种数据分析。
更严格
市面上的多通道系统分析的是相互独立的平行通道中发生的作用。而在SPRimager® II阵列系统中,所有芯片阵列上的探针都是堡垒在完全相同的分析物溶液中,并且从每***个探针采集数据的时间都完全相同。芯片阵列包括了正负控制探针,所提供的实验数据是***为严谨的 — 完全不需要另行设立单独的控制探针通道。如果***台双通道的系统要同时监控正负控制物就没有通道来处理实验样品了!
阵列模式除了实验的严谨性之外,GWC的阵列芯片基板从不使用右旋糖苷或其它可能引起混乱的多聚物来固定探针。这些多聚物会通过物理的阻碍或其带电的性质来阻碍分析物分子接近探针分子,因此会导致对亲和评估的错误信息。例如,在右图所示的结合平衡实验中,对于相同的分子,未使用右旋糖苷的结合比使用右旋糖苷的结合具有更好的亲和结果。请参阅Subramanian等人2006年发表的论文:An improved surface plasmon resonance method for determining the molecular basis of the calcium-dependent interactions of ALG-2, Calcium Binding Proteins. 1:56-61。
SpotReady™芯片基板规格
项目SpotReady™ 16SpotReady™25货号SPR-1000-016SPR-1000-025每个芯片基本的金斑数1625斑点直径1 mm0.7 mm建议点样体积包装0.5µL每包5片0.3µL每包5片
SPRimager® II系统相关资料(请点击下列标题):
1、SPR Imaging: Introduction (英文)
2、SPR Imaging Special Resolution (英文)
3、SPR Imaging Sensitivity (英文)